豬口蹄疫病毒O型抗體檢測試劑盒
簡要描述:豬口蹄疫病毒O型抗體檢測試劑盒的宗旨是以更優(yōu)服務(wù)、更高品質(zhì)、更低價格、更快供貨的“四更"要求為國內(nèi)廣大科研用戶提供更為完善的產(chǎn)品供應(yīng)和售后服務(wù),力求工作*,在處理客戶的咨詢、訂購、售后服務(wù)、等方面追求更專業(yè)、更快捷。
- 產(chǎn)品型號:
- 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
- 更新時間:2024-05-13
- 訪 問 量:2278
本產(chǎn)品僅用于科研,不用于臨床
豬口蹄疫病毒O型抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)使用說明書
【產(chǎn)品名稱】
通用名:豬口蹄疫病毒O型抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Porcine Foot and Mouth Disease Virus O (ELISA)
【包裝規(guī)格】 96T×1/盒、96T×2/盒
【預(yù)期用途】 口蹄疫是由口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus,F(xiàn)MDV)引起的偶蹄動物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病,其特征為口腔黏膜、蹄部、乳房皮膚發(fā)生水泡和爛斑。
本試劑用于檢測豬血清中口蹄疫病毒O型抗體,可用于口蹄疫病毒O型疫苗免疫效果評價。
【原 理】
本試劑盒系由預(yù)包被口蹄疫病毒O型VP1抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬口蹄疫病毒O型抗體。實(shí)驗(yàn)時在酶標(biāo)板中加入對照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有豬口蹄疫病毒O型抗體,則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標(biāo)記物,與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物,在孔中加TMB底物液,與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)椋挥妹笜?biāo)儀在450nm波長測定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有口蹄疫病毒O型抗體。
【試劑盒組成】
序號 | 名稱 | 規(guī)格(96T×1) | 規(guī)格(96T×2) |
1. | 酶標(biāo)板 | 96T×1 | 96T×2 |
2. | 酶標(biāo)記物 (紅蓋) | 11ml×1 | 11ml×2 |
3. | 抗體工作液 (藍(lán)蓋) | 5.5ml×1 | 11ml×1 |
4. | 20X濃縮洗滌液 | 40ml×1 | 40ml×1 |
5. | 底物液A (白蓋) | 6ml×1 | 11ml×1 |
6. | 底物液B (黑蓋) | 6ml×1 | 11ml×1 |
7. | 終止液 (黃蓋) | 6ml×1 | 11ml×1 |
8. | 陽性對照 (紅蓋) | 1.0 ml×1 | 1.5 ml×1 |
9. | 陰性對照 (綠蓋) | 1.0 ml×1 | 1.5 ml×1 |
10. | 蓋板膜 | 1張 | 2張 |
11. | 自封袋 | 1個 | 1個 |
12. | 說明書 | 1份 | 1份
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【儲存及有效期】 于2~8℃避光保存,有效期為12個月。
包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。
【適用儀器】 含450nm、630nm波長的酶標(biāo)儀,37℃恒溫設(shè)備,可調(diào)微量移液器。
【樣品準(zhǔn)備】
1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內(nèi)可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按40倍稀釋(如5μl血清加入195μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
【檢驗(yàn)方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復(fù)至室溫。
2.取所需用量酶標(biāo)板條,設(shè)空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,置37℃反應(yīng)30分鐘。
5.扣去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,拍干。
6.每孔加酶標(biāo)記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應(yīng)30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應(yīng)10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調(diào)零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
【參考值】 實(shí)驗(yàn)正常的情況下,陰性對照≤0.10,陽性對照≥0.6。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1.樣品A值≥0.25為陽性;樣品A值在0.15到0.25之間為可疑;樣品A值<0.15為陰性。
2.本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性或可疑時表明豬只抗體水平不足,建議補(bǔ)打相應(yīng)疫苗。
【試驗(yàn)方法的局限性】
該試驗(yàn)僅作為定性檢測豬血清、血漿中豬口蹄疫病毒O型抗體,根據(jù)A值高低可作抗體水平強(qiáng)、中、弱的粗略評估。
【注意事項(xiàng)】
1.實(shí)驗(yàn)操作時需戴手套、穿工作衣,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實(shí)驗(yàn)廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性,應(yīng)避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。
3.酶標(biāo)板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋,未用完的酶標(biāo)板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶,使用時需恢復(fù)至室溫以*溶解。
5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。
7.試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8.不同批號試劑組分不得混用。
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