小鼠尿微量白蛋白酶聯(lián)免疫分析
小鼠尿微量白蛋白酶聯(lián)免疫分析
小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:
本ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠尿微量蛋白(ALB)水平。用純化的小鼠尿微量蛋白(ALB)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入尿微量蛋白(ALB),再與HRP標(biāo)記的ALB抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的尿微量蛋白(ALB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠尿微量蛋白(ALB)濃度。
注意事項(xiàng):
如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于尺度品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。本試劑不同批號(hào)組分不得混用。各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并常常校對(duì)其正確性,以避免試驗(yàn)誤差。ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中掏出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保留。濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。嚴(yán)格按照仿單的操縱進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判斷必需以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做尺度曲線,做復(fù)孔。底物請(qǐng)避光保留。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)目多,推薦使用排槍加樣。如與英文仿單有異,以英文仿單為準(zhǔn)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。