魚細胞凋亡因子(Fas)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
魚細胞凋亡因子(Fas)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中魚細胞凋亡因子 (Fas)亡因子(Fas)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入細胞凋亡因子(Fas),再與 HRP 標記的細胞凋亡因子(Fas)體,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)用純化的魚細胞凋過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在H酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的細胞凋亡因子(Fas)呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中魚細胞亡因子(Fas)濃度。
試劑盒組成標本要
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因 NaN3抑制辣根過(HRP)活性。
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與 OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 O值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
魚細胞凋亡因子(Fas)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有析出,稀釋時可在浴中加溫助溶,洗滌時不影響
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在 5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD值大于標準品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后以總稀釋倍。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
魚細胞凋亡因子(Fas)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月