兔(rabbit)去甲腎上腺素(NOR) 試劑盒說明書
兔(rabbit)去甲腎上腺素(NOR)
本試劑盒僅供研究使用 標本:血清或者血漿
- 試 劑 組 成
精密度微孔板96孔 | (Microtitration Strips) | 1塊 | 2~8℃干燥保存 |
酶標偶合液 | (Conjugate ) | 1瓶 12.0毫升 | 2~8℃冷藏保存 |
標準品 | (Standard) | 5瓶 各1.0毫升 | 2~8℃冷藏保存 |
呈色劑A | (Substrate A) | 1瓶 6.0毫升 | 2~8℃避光冷藏保存 |
呈色劑B | (Substrate B) | 1瓶 6.0毫升 | 2~8℃避光冷藏保存 |
終止液 | (Stopping Solution) | 1瓶 6.0毫升 | 室溫保存 |
20倍濃縮洗滌液 | (Rinsing Buffer x 20) | 1瓶 60.0毫升 | 2~8℃冷藏保存 |
5倍濃縮樣品稀釋液 | (Diluent x 5) | 1瓶 15.0ml | 2~8℃冷藏保存 |
英文說明書,中文說明書 |
| 各一份 | 室溫保存 |
二、ELISA試劑盒注意事項
1. 此試劑為體外檢測試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。
- 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
- 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘。
- 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘
- 若24小時內(nèi)進行實驗,標本可存放于2~8℃。不需及時實驗,標本-20℃保存,避免反復凍融。
- 在反復清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低度,造成吸光度偏離的假像。
- 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
- 試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標示。
三、ELISA試劑盒實驗前準備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準備各種實驗儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
四、操 作 步 驟
1.取出酶標板,設(shè)空白孔,依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標準品于空白微孔中(空白孔視為0號標準品,用醫(yī)用蒸餾水替代)
2、分別標記樣品編號,加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。
3、將酶標板置于37℃溫育30分鐘;
4、將酶標板板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,立即甩去液體;
5、每個孔中加滿應(yīng)用洗滌液后,輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。
6、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。
7、在標準品孔和樣品孔中加入100μl的酶標偶合溶液。
8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9、將酶標板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,立即甩去液體。
10、每個孔中再次加滿洗滌應(yīng)用液后,室溫輕微振搖酶標板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標板拍干。
11、重復第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標板拍干。
12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。(A液、B液采用不同的吸頭加樣)
13、將酶標板置于37℃避光溫育反應(yīng)15分鐘。
14、每個微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻。
15、在酶標儀上,450nm處測定OD; 顯色后,15分鐘內(nèi)進行測定。
16、根據(jù)制備的標準曲線,計算樣本含量
五、結(jié) 果 判 斷
1. 儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值;
2、檢測值范圍:0-800pg/ml
3、敏感度:5.0pg/ml