48T人白細(xì)胞介素-17ELISA檢測(cè)試劑盒
人白細(xì)胞介素-17ELISA檢測(cè)試劑盒
本試劑僅供研究使用 標(biāo)本:血清或血漿
試驗(yàn)原理:
IL-17試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知IL-17濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將IL-17和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-17的濃度呈比例關(guān)系。
自備材料
蒸餾水。
加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
人白細(xì)胞介素-17ELISA檢測(cè)試劑盒
操作注意事項(xiàng)
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人白細(xì)胞介素-17ELISA檢測(cè)試劑盒
操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。
試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。
人白細(xì)胞介素-17ELISA檢測(cè)試劑盒
結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的IL-17標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的IL-17含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3、檢測(cè)值范圍:0-800pg/ml
4、敏感度: 1.0 pg/ml
Trypsin Inhibitor, Lima Bean 胰蛋白酶抑制劑 (利馬豆) / 100mg
Trypsin Inhibitor, Ovomucoid 胰蛋白酶抑制劑 / 500mg
Trypsinogen >2500U/mg from bovine pancreas 胰蛋白酶原 / 100mg
Trypsinogen >2500U/mg from bovine pancreas 胰蛋白酶原 / 500mg
Tryptamine 色胺 [61-54-1] 1g
D-Tryptophan D-色氨酸 [153-94-6] 10g
DL-Tryptophan DL-色氨酸 [54-12-6] 10g
L-Tryptophan L-色氨酸 [73-22-3] 50g
L-Tryptophan L-色氨酸 [73-22-3] 250g
TTC 紅四氮唑 [298-96-4] 5g
TTC 紅四氮唑 [298-96-4] 25g
T-2 Toxin from Fusarium tricinctum, T-2毒素 [21259-20-1] 5mg
Tulobuterol hydrochloride 鹽酸妥洛特羅 [56776-01-3] 5g
Tungsten powder 鎢粉 (200目) [7440-33-7] 50g
Tungsten carbide-200 碳化鎢-200 [12070-12-1] 50g
Tungsten (VI) oxide 三氧化鎢 [1314-35-8] 100g
Tungstic (VI) acid 鎢酸 [7783-03-1] 100g
Tunicamycin from Streptomyces lysosuperficus .衣霉素 [11089-65-9] 5mg
Turpentine oil 松節(jié)油 [8006-64-2] 500ml
Tween-20 吐溫-20 [9005-64-5] 500ml
Tween-20 吐溫-20 [9005-64-5] 500ml
Tween-60 吐溫-60 [9005-67-8] 500ml
Tween-80 吐溫-80 [9005-65-6] 500ml
Tween-80 吐溫-80 [9005-65-6] 500ml
Tyramine hydrochloride 鹽酸酪胺 [60-19-5] 1g
D-Tyrosine D-酪氨酸 [556-02-5] 1g
DL-Tyrosine DL-酪氨酸 [556-03-6] 25g
DL-Tyrosine DL-酪氨酸 [556-03-6] 100g
L-Tyrosine L-酪氨酸 [60-18-4] 100g
L-Tyrosine L-酪氨酸 [60-18-4] 500g
L-Tyrosine disodium salt hydrate L-酪氨酸二鈉鹽 [69847-45-6] 25g
Tyrosine decarboxylase 酪氨酸脫羧酶 [9002-09-9] 25U
Tyrosine decarboxylase from Streptococcus faecalis 酪氨酸脫羧酶 [9002-09-9] 250mg
L-Tyrosine methyl ester hydrochloride L-酪氨酸甲脂鹽酸鹽 [3417-91-2] 25g
Undecyl β-D-maltoside 十一烷基β-D麥芽苷 [170552-39-3] 250mg
Uracil 尿嘧啶 [66-22-8] 100g
Uracil 尿嘧啶 [66-22-8] 500g
Uracil 尿嘧啶 [66-22-8] 25g
Uracil 尿嘧啶 [66-22-8] 100g
Ursodeoxycholic acid 熊去氧膽酸 [128-13-2] 5g
Urapidil hydrochloride 鹽酸烏拉地爾 [64887-14-5] 10g
Urea 尿素 [57-13-6] 500g
Urea 尿素 [57-13-6] 2kg
Urea 尿素 [57-13-6] 500g
Urea 尿素 [57-13-6] 2kg
Urease fromJack bean 脲酶 / 250mg
Urease fromJack bean 脲酶 / 1g
Uricase from Candida 尿酸酶 >2U/mg [9002-12-4] 100U
Uridine 尿苷 [58-96-8] 25g
Uridine 尿苷 [58-96-8] 100g
Ursolic acid 熊果酸 [77-52-1] 5g
DL-Valine DL-纈氨酸 [516-06-3] 25g
Vaseline 醫(yī)用 凡士林(石油脂I) [8009-03-8] 500g
Uridine-5’-diphosphate 尿苷5’-二磷酸二鈉鹽 [21931-53-3] 100mg
Uridine-5’-diphosphate 尿苷5’-二磷酸二鈉鹽 [21931-53-3] 500mg