使用ELISA試劑盒的時(shí)候注意的幾個(gè)細(xì)節(jié)問題
由于ELISA試劑盒價(jià)格低廉且準(zhǔn)確性搞、反應(yīng)時(shí)間短等利益,所以合適大批量的檢測(cè),一般常常用于食品安全檢測(cè)方面。 ELISA試劑盒又稱為酶聯(lián)免疫試劑盒,是現(xiàn)在許多生物制藥廠和醫(yī)療實(shí)驗(yàn)室常用的檢測(cè)設(shè)備,首要的實(shí)驗(yàn)辦法就是酶聯(lián)免疫吸附辦法。
ELISA是將酶催化的擴(kuò)大效果與特異性抗原抗體反應(yīng)結(jié)合起來的一種微量分析技術(shù)。酶符號(hào)抗原或抗體往后,既不影響抗原抗體反應(yīng)的特異性,也不改動(dòng)酶自身的活性。
ELISA試劑盒的操作原理:
ELISA的操作步驟:樣品收集保存、試劑預(yù)備、溫育、洗板、顯色、比色、包被、加樣、加酶標(biāo)抗體、終止反應(yīng)、結(jié)果判定。
ELISA試劑盒需求遵照的3個(gè)關(guān)鍵:
1.抗原或抗體能吸附于固相載體表面,并堅(jiān)持其免疫學(xué)活性;
2.抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶銜接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能堅(jiān)持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,并且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,可根據(jù)已知濃度的抗原或抗體的顏色反應(yīng)的深淺繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并依此計(jì)算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。