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三大常用ELISA實驗方法優(yōu)勢劣勢

2019-07-26 [1579]

今日,我司技能專員為您解析ELISA試驗三大常用方法的優(yōu)勢與下風(fēng),一同跟著研域(上海)小編來看看吧!總所周知,ELISA試劑盒法可分為多種類型測定,是一種廣泛應(yīng)用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技能。
一、直接法
    將抗原直接固定在固相載體上,參與酶符號的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。
優(yōu)勢:操作手續(xù)簡略,因無須運用二抗可防止交互反應(yīng)。
下風(fēng):試驗中的一抗都得用酶符號,但不是每種抗體都適合做符號,費用相對前進(jìn)。
二、ELISA試劑盒間接法
此測定方法與直接法相似,不同在于一級抗體沒有酶符號,改用酶符號的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。
優(yōu)勢:二抗能夠加強信號,并且有多種選擇能做不相同的測定分析。不加酶符號的一級抗體則能保留它多的免疫反應(yīng)性。
下風(fēng):交互反應(yīng)發(fā)作的機率較高。
三、雙抗體夾心法
被檢查的抗原包被在兩個抗體之間,其間一個抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個則是檢查抗體,此抗體可用酶符號后直接測定抗原的量;或不符號,再透過酶符號的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體有必要留心選擇,才可防止交互反應(yīng)或比賽相同的抗原結(jié)合部位。
優(yōu)勢:高活絡(luò)、高專一性,抗原無須事前純化。
下風(fēng):抗原一定得具有兩個以上的抗體結(jié)合部位。
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