試劑盒實驗為什么不是大家想要的結(jié)果?
我們在做實驗過程中能夠盡量避免哪些常犯的錯誤呢?就是這樣在不斷探索中尋求真理。絕大多數(shù)ELISA實驗人員zui頭疼的問題,莫過于實驗結(jié)果不理想。其實做科研實驗,很難有人能夠的實驗成功。但是,今天讓我們一起來看一下,影響ELISA實驗結(jié)果不理想的原因有哪些?
1. 正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說明書一致,否則可導(dǎo)致結(jié)果錯誤,實驗重復(fù)性差。
2. 要保證加液量一致 我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn),造成顯色不統(tǒng)一,判斷錯誤。
3. 操作前應(yīng)對實驗的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18 c~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。
4. 手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗滌次數(shù)不要超過說明書推薦的洗滌次數(shù),洗液在反應(yīng)孑l內(nèi)滯留的時間不宜太長。不要使洗液在孑l間竄流,造成孔問污染,導(dǎo)致假陰性或假陽性。
5. 顯色液量不可過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下,加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng),顯色液量不能過多,以免顯色過強(qiáng)。ELISA試劑盒的影響因素應(yīng)選用有國家批準(zhǔn)文號,質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品,不能圖便宜,忽視質(zhì)量保證。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi),在使用時先平衡至室溫,不同批號的試劑組分不宜交叉使用。試劑開啟后要在一周內(nèi)用完,剩余的試劑下次用時應(yīng)先檢查是否變質(zhì),顯色劑如被污染變色將造成全部顯色,導(dǎo)致錯誤結(jié)果。
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